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细胞冻存基本方法：１．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞２４小时前换液一次。２．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达５×１０(６)/ml，离心去上清，吸入离心管中。３．冻存液：先用培养液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。４．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加１.５毫升细胞悬液。５．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小牌，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。